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全文备索肝癌筛查:见“微”知著


  复旦大学附属中山医院的研究者发现,利用血浆中7个微小RNA(microRNA)建立的模型可以准确诊断早期肝癌。研究11月21日在线发表于《临床肿瘤学杂志》(Journal of Clinical Oncology)。

  研究者通过微阵列技术(microarray)比较了723个microRNA在肝癌患者与正常人群、病毒性乙型肝炎患者以及肝硬化患者间的差别。结合进一步的实时荧光定量PCR(RT-PCR),最终筛选出7个肝癌相关的血浆microRNA。这7个microRNA建立的诊断模型,对肝癌诊断的正确率高达88%。

  “众所周知,乙肝、肝硬化、肝癌是我国大部分肝癌的发展变化过程。该研究采用了三种不同的人群作为对照,包括健康人、慢性乙肝、乙肝肝硬化患者,将肝癌发展过程中不同时期的人群均纳入了对照组,因此筛选出的microRNA能将肝癌与各类对照人群区分开来,更适合临床应用。另外,肝癌是多因素多基因影响的疾病,该研究整合了7个血浆microRNA建立诊断模型,大大增强了肝癌诊断的效能。”——文章第一作者周俭教授

  “血浆microRNA检测在临床上的应用具有许多优势。首先,microRNA在血浆中能耐受RNA酶的降解,非常稳定;其次,检测方便,只需1ml血即可在数小时内得出结果,创伤小,利于连续动态检测和人群的大规模筛查;另外,检测技术要求简便、成本低,易于推广应用。利用血浆microRNA诊断模型可以诊断小于2cm的早期肝癌,使一大批原来由于缺乏有效诊断而失去治疗机会的肝癌患者得到及时的治疗,可望整体上提高肝癌患者的生存率,从而开创肝癌早诊早治的新局面。目前该成果正在申请中国、美国、日本和欧盟等国家的专利。相信不久的将来即可应用于临床,造福于广大肝病患者。”——文章通讯作者樊嘉教授

J Clin Oncol. 2011 Dec 20;29(36):4781-8. Epub 2011 Nov 21.

Plasma MicroRNA Panel to Diagnose Hepatitis B Virus-Related Hepatocellular Carcinoma.

Zhou J, Yu L, Gao X, Hu J, Wang J, Dai Z, Wang JF, Zhang Z, Lu S, Huang X, Wang Z, Qiu S, Wang X, Yang G, Sun H, Tang Z, Wu Y, Zhu H, Fan J.

136 Yi Xue Yuan Rd, Shanghai 200032, People's Republic of China.

PURPOSE More than 60% of patients with hepatocellular carcinoma (HCC) do not receive curative therapy as a result of late clinical presentation and diagnosis. We aimed to identify plasma microRNAs for diagnosing hepatitis B virus (HBV) -related HCC. PATIENTS AND METHODS Plasma microRNA expression was investigated with three independent cohorts including 934 participants (healthy, chronic hepatitis B, cirrhosis, and HBV-related HCC), recruited between August 2008 and June 2010. First, we used microarray to screen 723 microRNAs in 137 plasma samples for diagnosing HCC. Quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction assay was then applied to evaluate the expression of selected microRNAs. A logistic regression model was constructed using a training cohort (n = 407) and then validated using an independent cohort (n = 390). Area under the receiver operating characteristic curve (AUC) was used to evaluate diagnostic accuracy. Results We identified a microRNA panel (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a and miR-801) that provided a high diagnostic accuracy of HCC (AUC = 0.864 and 0.888 for training and validation data set, respectively). The satisfactory diagnostic performance of the microRNA panel persisted regardless of disease status (AUCs for Barcelona Clinic Liver Cancer stages 0, A, B, and C were 0.888, 0.888, 0.901, and 0.881, respectively). The microRNA panel can also differentiate HCC from healthy (AUC = 0.941), chronic hepatitis B (AUC = 0.842), and cirrhosis (AUC = 0.884), respectively. CONCLUSION We found a plasma microRNA panel that has considerable clinical value in diagnosing early-stage HCC. Thus, patients who would have otherwise missed the curative treatment window can benefit from optimal therapy.

同期述评:可行性、有效性及成本效益

中国台湾大学 陈(Chen),台北中央研究院 李(Lee)

  这项研究使用了足够大的样本数量,在血浆中发现多个可能与肝癌相关的microRNA。这一诊断模型可以足够准确地鉴别肝癌患者与健康人群、乙型肝炎患者以及肝硬化患者。

  血清甲胎蛋白(AFP)一直被用作肝癌诊断的生物标志物。但其最佳诊断临界浓度仍有争议。AFP 20ng/ml通常被用作肝癌早期诊断指标。因此,未来探讨在血清AFP低于20ng/ml患者中的microRNA浓度特征对于肝癌诊断的敏感性和特异性将会很有意义。结合AFP和microRNA将可能会提高肝癌早期诊断率。

  目前,CT和磁共振成像(MRI)等影像学检查能够探测到1~2cm的肝脏肿瘤。影像学检查的精度取决于肿瘤的大小和血运情况。作为未来研究的方向之一,应该检测不同大小肿瘤的microRNA表达模式,并建立基于这一模式的肿瘤分期。

  作为肝癌早期诊断的方法,腹部B超和microRNA模型应在有效性和成本效益等方面进行比较。如果这一microRNA诊断模型较B超检查更加经济,那么它将有潜力作为肝癌的一线诊断方法,继之以B超检查。

J Clin Oncol. 2011 Dec 20;29(36):4745-7. Epub 2011 Nov 21.

Early Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma by Multiple microRNAs: Validity, Efficacy, and Cost-Effectiveness.

Chen CJ, Lee MH.

ScD, Genomics Research Center, Academia Sinica, 128 Academia Rd, Section 2, Nankang, Taipei 11529, Taiwan.

专家点评:肝癌早期诊断新策略

解放军总医院肿瘤中心、第二军医大学肿瘤研究所 郭亚军

  肝细胞癌(肝癌)在全球范围内是第3位癌症杀手,在我国更是高居第2位的癌症死因。缺乏有效的早期诊断方法是肝癌患者高死亡率的一个重要原因。理想的肝癌早期诊断手段应具备以下特点:高特异性、高敏感度、低成本。

  目前的肝癌早期诊断方法主要包括影像学检查和生物标志物检测。其中,影像学方法主要受限于其高价格,而已广泛用于肝癌诊断的血清标志物AFP则缺乏高敏感度。因此,发展具有高准确性、低成本的肝癌早期诊断方法显得尤为迫切和重要。

  近日,《临床肿瘤学杂志》发表了复旦大学附属中山医院周俭教授、樊嘉教授等利用7个microRNA的组合对乙型肝炎病毒相关性肝癌进行诊断的文章,为肝癌的早期诊断带来了新的希望。

  与既往研究不同的是,此文对多达723个microRNA进行了筛选,临床血浆样本来自934个参试者,包括457个乙型肝炎病毒相关性肝癌患者,167个健康志愿者,169个慢性病毒性乙型肝炎患者以及141个肝硬化患者。

  首先,作者利用microRNA芯片对137份血浆样本进行分析,鉴定肝癌患者对正常人群、肝癌患者对慢性病毒性乙型肝炎患者、肝癌患者对肝硬化患者血浆中差异表达的microRNA。在初步筛选获得15个显著差异表达的候选microRNA后,他们采用102份样本利用定量RT-PCR的方法对这些microRNA进行了验证,筛选出7个确定差异表达的microRNA并利用305份样本进行了进一步验证。确立了基于Logistic回归模型的可区分肝癌患者和其他对照人群的microRNA组合。

  最后,作者又采用390份样本对建立的micro-RNA诊断组合的准确性进行了验证,证实此micro-RNA组合能够有效区分肝癌患者与正常人群、慢性病毒性乙型肝炎患者及肝硬化患者。

  这项研究成果对于肝癌的早期发现、早期治疗及提高患者生存率具有重要意义。

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中国儿科肠内肠外营养支持临床应用指南
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